纳豆激酶提取物

纳豆激酶提取物

分类:植物提取物 2019年01月14日 阅读

纳豆在发酵过程中,由纳豆枯草杆菌产生一种丝氨酸蛋白酶。纳豆激酶具有纤溶活性,可以治疗和预防血栓疾病。

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英文名:NattoKinase

结构类型:单链多肽,碱性蛋白酶 #FormatImgID_1#

1.纳豆激酶的稳定性

pH稳定性

在自然pH值状态下,相对比较稳定,在pH值从7升至12时,室温下10min内稳定;pH值低于5时,则极为不稳定,很快失去活性;当温度超过60时则迅速因蛋白变性而失活。反复冻融五个循环时,其活性仍保存95%以上,从而表明冻融对纳豆激酶的活性无较大影响。当纳豆激酶与煮沸的小麦提取液、煮沸的肉汤以及血清蛋白和胃粘液蛋白混合后,纳豆激酶的稳定有明显增加,甚至在酸性pH值时,酶活性也并不完全失掉。

热稳定性

在温度低于45°C时活性相对稳定,高于60°C则因蛋白质变性而迅速失活,冻融对纳豆激酶的活性无较大影响,反复冻融5次后,该酶仍能保持95%以上的活性。

金属离子稳定性

纳豆激酶的活性还受一些金属离子的影响,Hg2+会使其完全失活,Cu2+、Zn2+、Al3+、Ca2+等离子对该酶有不同的抑制作用,而Mg2+、Co2+则对其有激活作用。

其他物质稳定性

E-ACA和EDTA对纳豆激酶活性无明显影响,而PMSF能完全抑制其活性。1mmol/L的DFP和neguvon则能完全抑制纳豆激酶的活性。

2分子量

纳豆激酶是一种单链多肽酶,由于测定分子量的技术方法不同,因此所测得到的分子量也有明显不同。用SephadexG100柱凝胶过滤法,得到的结果为20000,用园二色方法测定为27300。根据氨基酸顺序计算出该酶的准确分子量为27.728。

3.PI值(等电点)

用Svunsson的柱型电泳法,等电聚焦测定纳豆激酶具有对称的单一的纤溶酶峰,其PI值为8.6±0.3。等电点可以提供在分离提纯纳豆激酶时,考虑调pH值在PI值附近,有利于酶的纯化。

4.纳豆激酶的底物特异性

NK作为丝氨酸蛋白酶,其酰胺水解活性可通过许多合成底物进行观察。对纳豆激酶最敏感的底物为血浆纤溶酶的底物,即S2251;对底物H2DLArgPNA,S2238,S2266和S2302具有一定的活性,而对S2444和S2484则明显地无活性。纳豆激酶有其特异的水解蛋白的氨基酸作用和识别位点。

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纳豆激酶的4种功效及副作用

更特别的是纳豆激酶比起医生常用的的溶血栓药物尿激酶(Urokinase)来的更安全且效用更高,一般心肌梗塞发作而处于危险状态的患者,会立即使用尿激酶(约20万单位),但在体内只有半小时的溶血栓效果,但只要吃一盒(约100公克的纳豆),就可发挥约8到12小时的溶血栓功效,是药物的20多倍。

而且纳豆激酶只溶解血栓造成的纤维蛋白,不会有药物造成的出血等多种副作用,是非常完美的药物天然替代品。

纳豆激酶经科学验证的功效

1.预防及溶解血栓

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现代人饮食西化,常吃下过多的高脂肪及碳水化合物,蔬菜水果又吃太少,造成血管出现血栓提早老化,甚至有10多岁就发现血管硬化,20岁就中风的案例。

血栓虽然被视为坏东西,但其实在体内它有修复血管及止血功能,而任务完成时就会被血栓溶解酵素给分解掉,一旦这种酵素减少分泌或失去功能,体内血栓便会快速增加,并引起心肌梗塞、脑中风及血管型失智等疾病。

NutritionResearch期刊曾于2009年发表研究指出,针对心血管疾病的高风险患者,每日服用2,000FUs的纳豆激酶两次,两个月后抽血发现血栓大幅下降,对于心血管有保护作用,能避免心肌梗塞、脑中风的发生。

2.降血压

高血压常被认为是要一辈子吃药控制的疾病,但现在临床研究发现纳豆激酶就有显着的降血压功效,而且还没有西药带来的诸多副作用。

HypertensionResearch期刊于2008年曾刊载一则研究,指出高血压患者连续八周服用2,000FUs的纳豆激酶,能让血压显着下降,这是由于纳豆激酶能抑制让血压提升的酵素,因此纳豆激酶能预防甚至治疗高血压的发生。

3.预防老年失智症

失智.痴呆,我想是你我到老年都会害怕得到的疾病,不仅会渐渐遗忘熟悉的人,在生活上还会失去自理能力,而老年失智症或是痴呆不外乎是脑血管老化、阻塞导致氧气及养份无法输送至脑部而发生。

华人较常发生的"血管型失智"多半是由于脑内微血管被血栓堵住所引起,因此服用纳豆激酶能溶解血栓,预防失智。

而国外常见的另一种退化型失智"阿兹海默症",则是与大脑淀粉斑块不正常堆积及神经纤维纠结有关,JournalofAgriculturalandFoodChemistry期刊在2009年曾发布研究指出,服用纳豆激酶能分解这类淀粉斑块,因此有治疗及预防阿兹海默症的潜力。

4.降胆固醇

胆固醇过高是健检常见的红字项目,坏胆固醇过多,血管容易形成斑块,引发阻塞,一旦发生感染、天气变冷、暴怒等状况,就容易引发中风、心肌梗塞、猝死等危机。

AsiaPacificJournalofClinicalNutrition(亚洲临床营养学期刊)在2009年曾发表一则研究,指出纳豆激酶搭配红麴萃取能有效降低总胆固醇.坏胆固醇.三酸甘油脂并且能提升好胆固醇

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更重要的是使用这些营养品不会有降胆固醇西药史他汀(Statin)带来的诸多副作用(如疲倦.心脏无力.丧失记忆.肌肉疼痛.肝脏受损)。

纳豆激酶的副作用

纳豆激酶

正常使用下是安全无虞的,但由于纳豆激酶具有抗凝血特性,因此符合以下条件请勿使用(若误用可能增加出血风险),或使用前请务必谘询医生:

1.如果身体有出血伤害如胃溃疡、痔疮或创伤;

2.手术前2周;

3.正服用抗凝血药物如warfarin,aspirin,heparin或者是消炎药ibuprofen。

由于纳豆激酶有降血压的功效,若患有低血压及严重贫血者请勿使用,因为它会使血压降低,进一步导致恶心及头晕的可能,还有孕妇也请勿使用。

基因结构

基因与蛋白质结构

NakamuraT于1992年首次对一株纳豆芽孢杆菌NC21中的NK基因进行了研究,报道了包括调控顺序在内的1473bp的NK全基因序列[5]。NK基因从第181个碱基开始,以GTG为起始密码子,随后是1143bp组成的阅读框架,分为三个部分(见图1):分别是信号序列(signalsequence)、前序列(prosequence)和成熟序列(maturegene),相应的编码29个氨基酸的信号肽(signalpeptide)、77个氨基酸的前肽(propeptide)和275个氨基酸的成熟肽(maturepeptide)。结构基因的3末端为连续的三个终止密码子TAA,TAG,TAA。终止密码子之后一段序列可形成茎环结构,即因子非依赖性终止顺序。起始密码子上游17bp处为核糖体结合位点AAAGGAG。SD序列上游是一个AT含量高达72%的转录调控区域,但在此区域尚未找到与已知枯草杆菌启动子相类似的保守序列。

蛋白质结构

根据NK基因的DNA序列推出其氨基酸序列的一级结构,确定纳豆激酶由275个氨基酸组成,是一种单链多肽酶,其含有8个赖氨酸残基,肽酶可将其水解成9个小肽,该酶的活性部位在Asp32,His64,Ser221处,底物结合部位在Ser125,Leu26和Gly127处。NK基因的阅读框序列推导的氨基酸组成显示其共编码381个氨基酸,其中N端29个氨基酸组成信号肽(signalpeptide),随后的77个氨基酸组成前肽(propeptide),成熟肽组成与氨基酸序列测定相符。

分离纯化 有关纳豆激酶辨别纯化的研究报导,绝大年夜大年夜局部采纳的是传统的蛋白质辨别纯化手段,瓜代应用沉淀、盐析、离心、过滤和色谱等技能。

 

1.经过过程硫酸铵分级沉淀、CM-SepharoseF.F.柱层析、冷冻古板获得纳豆激酶。优化了纳豆激酶辨别纯化工艺。

2.以SubtilisinCarlsberg为摹拟蛋白,以AOT/isooctane反胶团系统为无机相,应用AOT/isooctane反胶团系统从发酵液平辨别纯化纳豆激酶.纳豆激酶经过一次萃取轮回,蛋白质收受采取率约为33.25%,酶朝气收受采取率达到80.2%,纯化因子约为2.5旁边.

标签:纳豆激酶 改善心脑血管

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